無菌檢查的定義以及局限性

2015-02-16 16:21:15 admin

無菌檢查的定義以及局限性

GMP微生物滅菌的專業知識無菌”從定義上來說是一個絕對的概念，但遺憾的是，在科學和技術高度發展的今天，藥品的絕對無菌是做不到的，也無法加以證實。然而，無菌制劑的安全性要求人們設定無菌的相對標準。FDA、歐洲制藥工業界曾將百萬分之一微生物污染率作為滅菌產品“無菌”的相對標準，它和蒸汽滅菌后產品中微生物存活的概率為10-6（即產品的無菌保證值為6），系同一標準的不同表示法。這一標準于1980起收錄于USP 中，如今已為世界各國普遍接受和采用。

     無菌檢查基本定義：檢查要求無菌的藥品、醫療器具、原料、輔料、以及要求無菌的其他物品是否染有活菌的一種方法。
    符合無菌檢查法的規定僅表明了供試品在該檢驗條件下未發現細菌和真菌污染。
    無菌檢查法是建立在批產品受微生物污染是均勻的假設上。即使該批產品的污染非常均勻，檢出低污染的概率也是極低的。因此，無菌檢查存在風險和局限性。應盡量抽取批產品生產開始、結束或生產過程出現異常情況下的產品進行檢查。

    藥品生產中的污染來源
    人員
    在100級潔凈區或萬級背景下的局部100級潔凈區。人是無菌藥品生產中的主要污染源，即使在管理比較到位，生產設備自動化程度較好，操作人員素質較高的企業，人員操作所致的污染率也超過70%。
    水源性微生物
    絕大多數為革蘭氏陰性菌，不會形成芽孢，不耐熱。其代謝產物及細胞的尸體及碎片均屬細胞內毒素的污染源空氣中的微生物基本為革蘭氏陽性菌，有可能會形成芽孢使其耐熱性增大。

   無菌檢查的局限性
   無菌的定義
    理論上：無菌＝沒有任何活的微生物；實際上：我們無法證明產品中沒有活微生物存在。
    無法對整批產品進行100%檢驗無菌檢驗的結果只是一個基于“可能性”的判斷。無菌檢驗用培養基有其局限性對實驗結果的判定是基于“是否在培養基中生長”；培養條件（如溫度和時間）是有限的；我們的工作環境及操作是在相對無菌的狀態。

    無菌保證工藝：
    無菌保證工藝即：使產品達到規定的無菌保證水平的工藝過程。無菌保證工藝可分為兩大類：最終滅菌工藝（terminal sterilization process）和非最終菌生產工藝（aseptic processing）。
    最終滅菌工藝系指將完成最終密封的產品進行滅菌，以殺滅產品中的微生物的工藝。由此生產的無菌制劑稱為最終滅菌無菌藥品。我國和國際主要藥典規定通過最終滅菌使這類藥品中污染的微生物殘存概率下降致不高于10-6的水平，以SAL≤10-6表示。應通過滅菌工藝驗證確認已滅菌產品的無菌保證水平。

    非最終滅菌工藝非最終滅菌工藝系指在無菌環境條件下通過無菌操作生產無菌產品的方法。具體就是將組成藥品的原料和包裝材料分別滅菌或經除菌處理，在無菌條件下將其組裝成成品的工藝。經該工藝生產的無菌制劑稱為非最終滅菌的無菌藥品。世界衛生組織、歐盟以及美國FDA等對非最終滅菌的無菌藥品的無菌保證水平分別作出了規定。目前WHO、歐盟和我國送審稿GMP執行的標準是95%可信限下微生物殘存概率不超過0.1%，大致相當于3000瓶產品中不得有1瓶染菌的水平。美國FDA的標準要求更為嚴格，通俗的表達為5000瓶產品中不得有１瓶染菌。必須通過培養基灌裝模擬試驗來驗證生產工藝能達到上述標準。